基于多種指標(biāo)對(duì)不同品種雜柑進(jìn)行果實(shí)評(píng)價(jià)

柑橘類水果的全球產(chǎn)量在所有水果作物中排名第一，在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)種植[1]。我國(guó)柑橘?gòu)?949年到2018年栽培面積不斷擴(kuò)大，產(chǎn)量持續(xù)上升[2]。柑橘果實(shí)富含類黃酮[3]、酚酸[4]、類胡蘿卜素[5]、辛弗林[6]、檸檬苦素[7]等多種營(yíng)養(yǎng)功能成分，具有清除體內(nèi)自由基，抗癌等功效[3,8-9]。柑橘揮發(fā)性成分加工的產(chǎn)品已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到食品、化妝品、制藥行業(yè)中[10-12]。最新研究顯示某些黃酮類化合物具有預(yù)防或治療新型冠狀肺炎的潛力[13]。柑橘類水果果皮、果肉、果汁等部位均可利用，利用價(jià)值極高。葡萄柚皮納米原纖化纖維素可以用作冰淇淋中的脂肪替代品[14]。干橙子果肉可替代干玉米喂養(yǎng)荷斯坦牛犢[15]。橙皮精油具有抗菌能力，能用于生產(chǎn)抗菌膜和涂層[16]。柑橘纖維水合能力較強(qiáng)，能夠改善冷凍面團(tuán)的生產(chǎn)操作性，延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期[17]。

我國(guó)柑橘消費(fèi)量逐年上升，鮮果人均消費(fèi)已明顯高于世界平均消費(fèi)水平，但存在著結(jié)構(gòu)性過剩、季節(jié)性過剩等問題，難以滿足消費(fèi)者日益多元化的需求[18]。雜柑是通過多種柑橘品種雜交而來，大多為橘類和橙類，兼有鮮食、加工等多種特性，在國(guó)外交易價(jià)格也比橙類高，被視為21世紀(jì)柑橘主推品種[19]。雜柑品類繁多，且成熟期大多在春季和冬季，打破傳統(tǒng)柑橘在秋季成熟的局限，是現(xiàn)在柑橘產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的首選[20]。然而市場(chǎng)上雜柑品種層出不窮，更新速度快，且大部分研究都局限于雜柑的理化品質(zhì)，對(duì)其營(yíng)養(yǎng)功能成分研究較少，因此本研究選取市場(chǎng)廣泛認(rèn)可的7個(gè)雜柑品種，基于多種指標(biāo)，結(jié)合主成分分析法對(duì)其果實(shí)進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，以期為雜柑深加工提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

春見、清見、W默科特、不知火于各自成熟期采集于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所國(guó)家果樹種質(zhì)重慶柑桔圃；紅美人、大雅柑、沃柑分別收集于重慶忠縣和重慶開州。所有樣品均果形端正且較整齊，單果斑點(diǎn)不超過4個(gè)，無枯水，果皮淺橙黃色且著色均勻，各個(gè)樣品不少于30個(gè)，詳細(xì)信息見表1。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與試劑

本研究共使用3種類黃酮、7種酚酸、5種類胡蘿卜素、辛弗林和81種揮發(fā)性成分標(biāo)準(zhǔn)品。橙皮苷(98%)、丁酸乙酯(99.7%)，德國(guó)Dr．Ehrenstorfer GmbH公司；蕓香柚皮苷(>95%)、香風(fēng)草苷(>95%)、辛弗林(98.8%)、紫蘇醛(AR)、巴倫西亞橘烯(93.4%)，美國(guó)Chroma Dex公司；α-胡蘿卜素(≥98%)、葉黃素(≥97%)、玉米黃質(zhì)(≥95%)、β-隱黃質(zhì)(≥97%)、β-胡蘿卜素(≥97%)、檜烯(75%)、檸檬烯氧化物(≥95%)，美國(guó)Sigma-Aldrich公司；原兒茶酸(≥98%)、對(duì)羥基苯甲酸(≥98%)、咖啡酸(≥98%)、香草酸(≥97%)、對(duì)香豆酸(≥98%)、阿魏酸(≥98%)、芥子酸(≥98%)、1-辛烯-3-酮(95%)、羅勒烯(>90%)、醋酸辛酯(GC≥98%)、枯名醛(>99%)、香芹酮(95%)、肉桂醛(>98%)、反,反-2,4-癸二烯醛(>90%)、β-欖香烯(HPLC≥98%)、β-丁香烯(GC≥98%)、反式-β-金合歡烯(AR)、α-石竹烯(GC≥95%)、諾卡酮(≥98%)，上海源葉生物科技有限公司；己醛(97%)、反式-2-己烯醛(98%)、順式-3-己烯醇(98%)、正己醇(≥98%)、正庚醛(≥97%)、2,4-己二烯醛(>95%)、α-蒎烯(98%)、苯甲醛(≥98%)、β-蒎烯(98%)、正庚醇(≥99%)、甲基庚烯酮(≥98%)、月桂烯(≥75%)、正辛醛(≥99%)、3-蒈烯(>90%)、α-松油烯(>90%)、乙酸己酯(≥99%)、檸檬烯(95%)、桉葉油醇(99%)、γ-松油烯(>95%)、正辛醇(99.5%)、異松油烯(85%)、對(duì)異丙基甲苯(>95%)、芳樟醇(98%)、正壬醛(96%)、辛酸甲酯(>99%)、香茅醛(96%)、正壬醇(98%)、4-松油烯醇(98%)、α-松油醇(98%)、己酸丁酯(>98%)、丁酸反-2-己烯基酯(>93%)、正癸醛(97%)、香茅醇(98%)、橙花醇(97%)、香葉醇(97%)、香葉醛(97%)、正癸醇(≥98%)、紫蘇醇(90%)、正十一醛(97%)、2-甲基肉桂醛(95%)、乙酸橙花酯(95%)、乙酸香葉酯(95%)、己酸己酯(>98%)、香草醛(AR)、月桂醛(95%含250 μg/mL BHT,穩(wěn)定劑)、β-紫香酮(≥97%)、鄰苯二甲酸二乙酯(≥99.5%)、葵酸甲酯(≥99%)，阿拉丁試劑(上海)有限公司；α-水芹烯(GC≥80.3%)、橙花醛(>99%)、古巴烯(>98%)、順式-β-金合歡烯(>98%)、大牛兒烯D(99%)、β-芹子烯(90%)、α-布藜烯(AR)，加拿大TRC公司；對(duì)傘花烴(>99%)、香葉基丙酮(>98%)、辛酸己酯(≥99%)，北京邁瑞達(dá)科技有限公司；順-4-癸烯醛(>95%)，阿法埃莎(中國(guó))化學(xué)有限公司；百里香酚(AR)，上海笛柏生物科技有限公司；香芹酚(99%)，上海邁瑞爾化學(xué)技術(shù)有限公司；丁香酚(99%)，上海Macklin生物化學(xué)有限公司；α-金合歡烯(>99.9%)，東京化成工業(yè)株式會(huì)社；紅沒藥烯(95%)，法國(guó)A2S公司。

表1 柑橘樣品信息
Table 1 The information of citrus

試劑：環(huán)己酮(分析純)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol，BHT)(≥99%)，德國(guó)Dr．Ehrenstorfer GmbH公司；抗壞血酸、NaOH、KOH、Na2SO4，均為分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；丙酮、乙酸、甲酸，均為色譜純，重慶川東化工(集團(tuán))有限公司；甲醇、乙腈、二甲基亞砜、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚(tert-Butyl methyl ether，MTBE)、正己烷，均為色譜純，阿拉丁試劑(上海)有限公司。

1.3 儀器與設(shè)備

MASTER-20T糖量計(jì)，日本ATAGO公司；KQ5200DE超聲波清洗器，江蘇昆山市超聲儀器有限公司；Sigma 3K15高速冷凍離心機(jī)，美國(guó)Sigma公司；0.22 μm有機(jī)相針式濾器，上海安譜科學(xué)儀器有限公司；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；KS260搖床，德國(guó)IKA公司；SHZ-D型循環(huán)水式真空泵，鞏義予華儀器有限公司；Millpore超純水器，美國(guó)Millpore公司；氮吹儀，杭州奧盛儀器有限公司；UPLC色譜儀(2996 PDA檢測(cè)器)，美國(guó)Waters公司；Agilent 1200 液相色譜儀(G1311A Quat Pump，G1314B VWD)、7890A/5975C氣相色譜-單四極桿質(zhì)譜儀，美國(guó)Agilent公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 理化指標(biāo)的測(cè)定

取大小中等的樣品10個(gè)，分別測(cè)定單果重、縱徑、橫經(jīng)；后將樣品橫切，取適中部位測(cè)定果皮厚度。用榨汁機(jī)榨汁，雙層紗布過濾裝進(jìn)燒杯，將果肉渣從果皮里剝出來，放在過濾果汁后的雙層紗布里，擠壓至感到費(fèi)力，不再流出大量果汁即可，果汁放入分裝容器中備用。分別稱取果渣、果皮質(zhì)量。

可溶性固形物使用糖量計(jì)測(cè)定；可滴定酸測(cè)定采用NAOH滴定法，參照國(guó)標(biāo)GB/T 8210—2011；維生素C測(cè)定采用2,6-二氯靛酚滴定法，參照國(guó)標(biāo)GB 5009.86—2016，按公式(1)(2)(3)進(jìn)行計(jì)算：

果形指數(shù)

(1)

可食率/%=×100

(2)

出汁率

(3)

2.2 營(yíng)養(yǎng)功能成分的測(cè)定

取雜柑樣品10～20個(gè)，采用四分法切開，取對(duì)角部分，將果皮和果肉分開，果肉保留囊衣剔除種子。果皮、果肉放入食品加工器中徹底粉碎，制成待測(cè)樣，放入分裝容器中備用。果汁同2.1。本研究中不同品種雜柑同一部位含水量接近，為統(tǒng)一起見，營(yíng)養(yǎng)功能成分采用鮮重計(jì)。

2.2.1 類黃酮測(cè)定

前處理方法：分別稱取果皮、果肉、果汁鮮樣5.00 g，加入10 mL V(甲醇)∶V(二甲基亞砜)=1∶1混合液，超聲提取30 min，10 000 r/min離心10 min，收集上清液，果肉、果汁提取2次，果皮提取3次，合并提取液，果肉、果汁甲醇定容至25 mL，果皮甲醇定容至50 mL，經(jīng)0.22 μm微孔有機(jī)濾膜過濾后上機(jī)檢測(cè)。

采用超高效液相色譜法[21]檢測(cè)。根據(jù)保留時(shí)間和紫外可見光光譜定性，外標(biāo)法定量。

2.2.2 酚酸測(cè)定

前處理方法：分別稱取果皮、果肉、果汁鮮樣5.00 g，加入10 mL NaOH溶液(4 mol/L)，渦旋或振蕩反應(yīng)2 h，調(diào)節(jié)pH至2.0(6 mol/L鹽酸)，有明顯顏色變化后，10 000 r/min離心10 min；取上清液約20～25 mL，加入V(乙酸乙酯)∶V(甲基叔丁基醚)=1∶1混合液至50 mL，果肉、果汁萃取2次，果皮3次；輕搖振蕩，防止乳化，合并萃取液，40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用50%(體積分?jǐn)?shù))甲醇水溶液定容至5 mL，經(jīng)0.22 μm微孔有機(jī)濾膜過濾后上機(jī)檢測(cè)。

檢測(cè)方法：參照超高效液相色譜法[22]。根據(jù)保留時(shí)間和紫外可見光光譜定性，外標(biāo)法定量。

2.2.3 類胡蘿卜素測(cè)定

前處理方法：分別稱取果皮、果肉、果汁鮮樣5.00 g，加入25 mL V(正己烷)∶V(丙酮)∶V(乙醇)=2∶1∶1，含0.1%(體積分?jǐn)?shù)，下同)BHT，高速勻漿提取8 min，離心分層，收集有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(40 ℃)濃縮至干，用約2 mL MTBE(含0.1% BHT)洗滌燒瓶。提取液中加入2 mL 10% KOH-甲醇溶液(含0.1% BHT)，避光反應(yīng)12 h。加入5 mL水和2 mL MTBE(含0.1% BHT)，收集有機(jī)相，加入4 mL MTBE(含0.1% BHT)再洗滌1次，收集有機(jī)相。合并后的有機(jī)相用5 mL水洗滌2次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，氮吹至干(40 ℃)，用MTBE(含0.1 %BHT)定容至2.0 mL，經(jīng)0.22 μm 微孔有機(jī)濾膜過濾后上機(jī)檢測(cè)。

采用超高效液相色譜法[23]檢測(cè)。根據(jù)保留時(shí)間和紫外可見光光譜定性，外標(biāo)法定量。

2.2.4 辛弗林測(cè)定

前處理方法：分別稱取果皮、果肉、果汁鮮樣5.00 g，加入10 mL甲醇，超聲提取30 min，10 000 r/min離心10 min，收集上清液，果肉、果汁提取2次，果皮提取3次，合并上清液，果肉、果汁甲醇定容至25 mL，果皮定容至50 mL，經(jīng)0.22 μm 微孔有機(jī)濾膜過濾后上機(jī)檢測(cè)。

采用液相色譜法[24]檢測(cè)。根據(jù)保留時(shí)間和紫外可見光光譜定性，外標(biāo)法定量。

2.2.5 揮發(fā)性成分測(cè)定

樣品前處理：稱取果皮鮮樣3.00 g，放于20 mL螺口樣品瓶中，加入3 mL飽和食鹽水和2 μL環(huán)己酮(內(nèi)標(biāo)物)，用聚四氟乙烯隔墊密封，于50 ℃磁力攪拌器上加熱平衡20 min。用萃取頭頂空吸附50 min后，將萃取頭插入GC進(jìn)樣，解析5 min。

采用HS-SPME-GC-MS[25]法檢測(cè)。利用Flavour 2.0、NST 08質(zhì)譜庫(kù)和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)其定性，使用內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行半定量。

2.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)；采用R studio 4.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，利用LSD進(jìn)行顯著性分析(P<0.05)；采用Rstudio4.0軟件ggplot2函數(shù)繪圖。

3 結(jié)果與分析

3.1 理化品質(zhì)差異性分析

由表2可知，單果重為109.18～307.90 g，最輕為W默科特，最重為紅美人。清見、春見、不知火果皮較厚，超過3 mm，W默科特和大雅柑果皮較薄。從縱徑、橫徑看出，春見較大，沃柑較小。果形指數(shù)越接近1，表明品種越接近圓型，紅美人、清見、不知火以及大雅柑，果型指數(shù)均接近0.9，品種偏圓，而春見、W默科特、沃柑都偏扁型。

表2 雜柑外在品質(zhì)
Table 2 Outer quality of seven hybrid citrus

由表3可知，紅美人出汁率最高(68.90%)，比重慶主栽甜橙高[26]，沃柑次之，為60.60%，其余均小于60%，最低為不知火(47.36%)。出汁率越高，水分越充足，口感較好。近年來，雜柑兼具橙和橘的特點(diǎn)，表現(xiàn)出較高的出汁率，具有成為除橙汁外的果汁原料的前景。雜柑總體上維生素C含量偏低，7種雜柑維生素C含量平均值為40.6 mg/100 g，略低于甜橙[26]，比溫州蜜柑高[22]。不同雜柑品種維生素C含量為23.62～67.95 mg/100 g，不知火含量最高，這與張靜等[22]的結(jié)果一致，且約為W默科特的3倍。

根據(jù)GB/T 12947—2008，由可溶性固形物、可滴定酸、固酸比和可食率4個(gè)理化指標(biāo)評(píng)價(jià)等級(jí)，結(jié)果見表3。此次實(shí)驗(yàn)樣品中，紅美人是7個(gè)雜柑品種中唯一的優(yōu)等果，其可食率≥75%，可滴定酸≤0.95，固酸比≥10.0∶1，且可溶性固形物≥10.0。其次為沃柑，判定等級(jí)為一等果，與紅美人相比，可食率偏低。春見、清見、大雅柑可食率均低于70%，不符合等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，且清見、W默科特可溶性固形物<9∶1，清見、不知火可滴定酸>1，均在等級(jí)判定標(biāo)準(zhǔn)外。

表3 雜柑內(nèi)在品質(zhì)
Table 3 Intrinsic quality of seven hybrid citrus

3.2 營(yíng)養(yǎng)功能成分差異性分析

3.2.1 類黃酮

由圖1可知，果皮中3種類黃酮總含量最高，平均值達(dá)到6 501.81 mg/kg FW，約為果肉的6倍，果汁的24倍，且同一品種同一部位含量均為橙皮苷>蕓香柚皮苷>香風(fēng)草苷，這與橙類[27]和溫州蜜柑[22]規(guī)律一致。

圖1 雜柑不同部位(果皮、果肉、果汁)類黃酮含量
Fig.1 The content of flavonoids in different parts (peel, pulp, juice) of seven hybrid citrus 注：不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)(下同)

雜柑果皮是橙皮苷的良好來源，橙皮苷含量占果皮中類黃酮82.81%，含量變幅為4 484.72～7 029.89 mg/kg FW，清見最高；果肉中春見最高(1 029.28 mg/kg FW)，其余品種橙皮苷含量均在1 000 mg/kg FW以下；果汁中，春見含量(449.48 mg/kg FW)顯著高于其他品種，約為不知火的7倍，紅美人的9倍。蕓香柚皮苷含量占果皮中類黃酮11.87%，不知火最高，達(dá)1 382.84 mg/kg FW，約為沃柑的6.5倍；果肉中，沃柑含量反而最高，其次為不知火，顯著高于其他品種；果汁中蕓香柚皮苷含量較低，均低于100 mg/kg FW，含量變幅為36.75～94.80 mg/kg FW；果汁中春見最高，紅美人最低。相對(duì)于其他雜柑，不知火果皮、果肉、果汁中蕓香柚皮苷含量較為豐富，可能是蕓香柚皮柑的良好來源。香風(fēng)草苷僅占果皮中類黃酮的4.90%，果肉中6.87%，果汁中6.60%，果皮中香風(fēng)草苷含量最高為紅美人，達(dá)726.39 mg/kg FW，而春見、清見、大雅柑含量均低于平均值318.32 mg/kg FW；果肉中含量最高為沃柑145.63 mg/kg FW，其次為W默科特，最低為清見；果汁中，W默科特含量最高，其次為沃柑。分析還發(fā)現(xiàn)清見果皮類黃酮總量最高，而香風(fēng)草苷含量卻是所有品種中最低的，說明含量相對(duì)不豐富。

3.2.2 酚酸

7種雜柑不同部位酚酸含量如圖2所示。果皮中7種酚酸平均含量呈以下規(guī)律：阿魏酸>咖啡酸>對(duì)香豆酸>芥子酸>香草酸>對(duì)羥基苯甲酸>原兒茶酸；果肉中，芥子酸含量高于對(duì)香豆酸；果汁中酚酸平均含量與果皮相同。阿魏酸在果皮中的含量為64.25～498.83 mg/kg FW，最高為沃柑；咖啡酸含量最高的是大雅柑(170.52 mg/kg FW)，約是清見的8倍；對(duì)香豆酸平均含量為65.80 mg/kg FW，最高為沃柑；芥子酸含量為8.06～23.54 mg/kg FW，最低為紅美人。和其余品種果肉相比，沃柑阿魏酸、芥子酸、咖啡酸含量均為最高，酚酸(158.74 mg/kg FW)總量也最高。此外，與果皮中不同，清見果肉中對(duì)香豆酸的含量最高，與其他品種有顯著差異。雜柑中果皮、果肉、果汁中苯甲酸型酚酸含量均為香草酸>對(duì)羥基苯甲酸>原兒茶酸。果皮中香草酸的含量為7.47～16.15 mg/kg FW，最高的為W默科特，最低的為大雅柑；對(duì)羥基苯甲酸的含量為4.73～12.51 mg/kg FW，最高的為大雅柑；原兒茶酸的含量為1.08～2.21 mg/kg FW，最高為春見，最低為沃柑。果肉中，春見香草酸的含量顯著高于其他品種，苯甲酸型酚酸含量(9.03 mg/kg FW)也是所有品種中最高。沃柑果肉苯甲酸型酚酸含量偏低，而其果肉酚酸總量最高，說明沃柑果肉中肉桂酸型酚酸含量豐富。果汁中，苯甲酸型酚酸含量為0.96～8.76 mg/kg FW，春見仍為所有品種中最高，W默科特和沃柑都較低，紅美人最低。綜上可知，所有品種中，沃柑果皮、果肉中總酚酸含量最高，春見果肉果汁中香草酸、原兒茶酸含量較其他品種高。

圖2 雜柑不同部位(果皮、果肉、果汁)酚酸含量
Fig.2 The content of phenolic acid in different parts (peel, pulp, juice) of seven hybrid citrus

3.2.3 類胡蘿卜素

7種雜柑不同部位類胡蘿卜素含量如圖3所示。雜柑中類胡蘿卜素含量較低，果皮中平均含量為10.50 mg/kg FW，略高于果肉(10.19 mg/kg FW)，約為果汁的2倍，且均以β-隱黃質(zhì)為主。果皮中，β-隱黃質(zhì)的平均含量為2.94～12.60 mg/kg FW，大雅柑含量最高，清見最低；果肉中平均含量為6.58 mg/kg FW，略高于果皮，其中最高為W默科特(13.83 mg/kg FW)，最低為紅美人；果汁中，W默科特含量為6.92 mg/kg FW，顯著高于其他品種。玉米黃質(zhì)果皮平均含量為3.15 mg/kg FW，占果皮總類胡蘿卜素的30%，含量最高的為沃柑(8.07 mg/kg FW)，約是紅美人的10倍；果肉、果汁中玉米黃質(zhì)含量均為沃柑最高。雜柑中葉黃素含量較少，果皮中平均含量為1.01 mg/kg FW，紅美人和大雅柑果汁中未檢出，3個(gè)部位葉黃素含量最高的品種均為W默科特。β-胡蘿卜素在少數(shù)品種少數(shù)部位中未檢出，而α-胡蘿卜素僅在W默科特和沃柑中檢出。值得一提的是，紅美人中類胡蘿卜素含量較其他品種偏低，尤其α胡蘿卜素和β胡蘿卜素，3個(gè)部位僅在果皮中檢出β-胡蘿卜素。綜上，大雅柑果皮中類胡蘿卜素含量最高，而W默科特在果肉果汁中類胡蘿卜素總量均為最高，可以作為雜柑中類胡蘿卜素的良好來源，這可能是由于其品種特殊，果皮顏色艷麗且較深。

圖3 雜柑不同部位(果皮、果肉、果汁)類胡蘿卜素含量
Fig.3 The content of carotenoids in different parts (peel, pulp, juice) of seven hybrid citrus 注：ND表示未檢出

3.2.4 辛弗林

7種雜柑不同部位辛弗林含量如圖4所示。辛弗林總體含量變化規(guī)律為果皮>果肉>果汁。7種雜柑果皮中平均含量為745.01 mg/kg FW，約為果肉的9倍，果汁的14倍。果皮中，含量最高的為W默科特(1 084.64 mg/kg FW)，和沃柑含量(997.04 mg/kg FW)相當(dāng)，顯著高于其他品種，約為不知火的3倍。果肉中，辛弗林含量為31.01～175.16 mg/kg FW，不同品種差異顯著，最高的為沃柑，最低的為不知火。果汁中含量為17.88～105.50 mg/kg FW，最高的為沃柑，最低的為不知火。由此得出，沃柑所有部位辛弗林含量都相對(duì)豐富，W默科特和沃柑可以作為辛弗林的良好來源，而不知火辛弗林含量相對(duì)較少。

圖4 雜柑不同部位(果皮、果肉、果汁)辛弗林含量
Fig.4 The content of synephrine in different parts (peel, pulp, juice) in seven hybrid citrus

3.2.5 果皮揮發(fā)性成分分析

對(duì)7種雜柑果皮中揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)，利用Flavour 2.0、NIST 08質(zhì)譜庫(kù)和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)其定性，使用內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行半定量，結(jié)果如圖5和表4。7種雜柑共檢出48種揮發(fā)性成分，根據(jù)半定量數(shù)據(jù)，整體占比為萜烯類(90.56%)、醛類(4.58%)、醇類(4.48%)、酯類(0.38%)，其中檸檬烯占萜烯類的85.60%，其次為γ-松油烯、月桂烯。7種雜柑的共有成分為11種，分別是α-蒎烯、月桂烯、檸檬烯、γ-松油烯、異松油烯、芳樟醇、α-松油醇、己醛、反式-2-己稀醛、苯甲醛以及月桂醛，均為柑橘中含量較為豐富的揮發(fā)性成分。紅美人中特有成分為對(duì)異丙基甲苯和正己醇；春見為辛酸甲酯；W默科特為β-蒎烯；不知火為乙酸橙花酯；大雅柑為是葵酸甲酯；沃柑中為3-蒈烯和α-檸檬香稀。各個(gè)品種不同種類揮發(fā)性成分占比不同，從圖5中可以看出萜烯類含量均超過75%，酯類含量均低于2%。與其他雜柑相比清見萜烯類含量最低，為84.01%，酯類含量最高占1.43%，醛類含量也最高，超過10%。紅美人萜烯類含量也較低，醇類的含量最高，為9.01%，W默科特和大雅柑，酯類含量極低，春見、不知火、沃柑揮發(fā)性成分種類占比相似。柑橘果皮揮發(fā)性成分豐富，可以作為香精、香料的重要來源。

圖5 雜柑果皮揮發(fā)性成分相對(duì)含量
Fig.5 Relative content of volatile components in the peel of seven hybrid citrus

表4 雜柑果皮揮發(fā)性成分半定量結(jié)果 單位：μg/g

Table 4 Semi-quantitative results of volatile components in seven hybrid citrus peels

續(xù)表4

注：ND表示未檢出

3.3 雜柑營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)

3.3.1 果皮營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)

由前述可知，果皮營(yíng)養(yǎng)功能成分含量豐富，選取果皮中所測(cè)3種類黃酮、7種酚酸、5種類胡蘿卜素、辛弗林作為指標(biāo)進(jìn)行主成分分析。運(yùn)用Rstudio 4.0將數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化和中心化，因指標(biāo)數(shù)大于樣品數(shù)，運(yùn)用prcomp函數(shù)，基于奇異值分解進(jìn)行主成分分析，結(jié)果如表5。選取特征值>1的前5個(gè)主成分，累積方差率達(dá)95.4%，可以解釋7種雜柑果皮大部分營(yíng)養(yǎng)功能成分指標(biāo)。第一主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為橙皮苷和香豆酸，載荷數(shù)分別為0.91和0.82；第二主成分具有較大解釋值的為香風(fēng)草苷和對(duì)羥基苯甲酸，載荷數(shù)分別為0.82和0.74；第三主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為α-胡蘿卜素和香草酸，載荷數(shù)為0.81和0.64；第四主成分具有較大解釋值的為咖啡酸，載荷數(shù)為0.64；第五主成分具有較大解釋值的為辛弗林，載荷數(shù)為0.52。

表5 果皮主成分結(jié)果 單位：%

Table 5 Principal component analysis results of peel

以每個(gè)主成分對(duì)應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率建立評(píng)價(jià)模型，其表達(dá)式為P=0.34PC1+0.26PC2+0.16PC3+0.12PC4+0.07PC5。由此可計(jì)算出7種雜柑果皮營(yíng)養(yǎng)功能成分綜合排序，結(jié)果見表6。根據(jù)綜合得分值，7種雜柑果皮營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)由高到低為：W默科特>沃柑>紅美人>不知火>春見>大雅柑>清見。

表6 主成分模型得分
Table 6 Principal component model score

3.3.2 果肉營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)

雜柑大多采用鮮食，營(yíng)養(yǎng)功能成分具有抗氧化能力，因此對(duì)果肉進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)功能成分綜合評(píng)價(jià)有重大意義。選取果肉中所測(cè)3種類黃酮、7種酚酸、辛弗林、5種類胡蘿卜素作為指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，方法同果皮，結(jié)果如表7。選取特征值>1的前5個(gè)主成分，累積方差率達(dá)95.0%，可以解釋7種雜柑果肉大部分營(yíng)養(yǎng)功能成分指標(biāo)。第一主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為玉米黃質(zhì)、阿魏酸、葉黃素、香風(fēng)草苷、芥子酸、辛弗林和蕓香柚皮苷，載荷數(shù)分別為0.96、0.93、0.86、0.85、0.83、0.82和0.80；第二主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為橙皮苷和對(duì)羥基苯甲酸，載荷值分別為0.89和0.86；第三主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為β-隱黃質(zhì)，載荷值為0.81；第四主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為β-隱黃質(zhì)和香豆酸，載荷值分別為0.47和0.43；第五主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為原兒茶酸，載荷值為0.50。

表7 果肉主成分結(jié)果 單位：%

Table 7 Principal component analysis results of pulp

以每個(gè)主成分對(duì)應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率作為權(quán)重建立綜合評(píng)價(jià)模型，其表達(dá)式為P=0.45PC1+0.20PC2+0.14PC3+0.09PC4+0.07PC5。由此可計(jì)算出7種雜柑果肉營(yíng)養(yǎng)功能成分的綜合排序，見表8。根據(jù)綜合得分值，7種雜柑果肉營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)由高到低為：沃柑>W默科特>不知火>大雅柑>紅美人>春見>清見。

表8 主成分模型得分
Table 8 Principal component model score

3.3.3 果汁營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)

雜柑出汁率高，具有加工前景。同果皮和果肉，選取果汁中所測(cè)3種類黃酮、7種酚酸、辛弗林、5種類胡蘿卜素作為指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，方法同果皮，結(jié)果如表9。選取特征值>1的前4個(gè)主成分，累積方差率達(dá)93.0%，可以解釋7種雜柑果汁大部分營(yíng)養(yǎng)功能成分指標(biāo)。第一主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為辛弗林、β-胡蘿卜素、蕓香柚皮苷和阿魏酸，載荷值分別為0.88、0.83、0.82和0.81；第二主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為對(duì)羥基苯甲酸、香草酸、香風(fēng)草苷和橙皮苷，載荷值分別為0.89、0.75、0.73和0.71；第三主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為芥子酸，載荷值為0.65；第四主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為咖啡酸，載荷值為0.61。

表9 果汁主成分結(jié)果 單位：%

Table 9 Principal component analysis results of juice

以每個(gè)主成分對(duì)應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率作為權(quán)重建立綜合評(píng)價(jià)模型，其表達(dá)式為P=0.41PC1+0.28PC2+0.15PC3+0.08PC4。由此可計(jì)算出7種雜柑果汁營(yíng)養(yǎng)功能成分的綜合排序，見表10。根據(jù)綜合得分值，7種雜柑果汁營(yíng)養(yǎng)功能成分評(píng)價(jià)由高到低為：春見>沃柑>W默科特>清見>大雅柑>不知火>紅美人。

表10 主成分模型得分
Table 10 Principal component model score

3.3.4 果皮揮發(fā)性成分評(píng)價(jià)

選取7種雜柑果皮中共有的11種揮發(fā)性成分進(jìn)行主成分分析，方法同果皮，結(jié)果如表11。選取特征值>1的前4個(gè)主成分，累積方差率達(dá)93.8%，可以解釋7種雜柑果皮揮發(fā)性成分大部分指標(biāo)。第一主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為α-蒎烯、月桂烯、異松油烯、γ-松油烯和檸檬烯，載荷值分別為0.97、0.96、0.93、0.93和0.91；第二主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為α-松油醇，載荷值為0.86；第三主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為己醛，載荷值為0.66；第四主成分具有較大解釋值的指標(biāo)為苯甲醛，載荷值為0.62。

表11 果皮揮發(fā)性成分主成分結(jié)果 單位：%

Table 11 Results of principal components of volatile components in peel

以每個(gè)主成分對(duì)應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率作為權(quán)重建立綜合評(píng)價(jià)模型，其表達(dá)式為P=0.53PC1+0.18PC2+0.13PC3+0.10PC4。由此可計(jì)算出7種雜柑揮發(fā)性成分的綜合排序，見表12。根據(jù)綜合得分值，7種雜柑揮發(fā)性成分評(píng)價(jià)由高到低為：紅美人>沃柑>清見>不知火>春見>W默科特>大雅柑。

表12 主成分模型得分表
Table 12 Principal component model score

4 結(jié)論

本文對(duì)我國(guó)7種雜柑理化性質(zhì)、3種類黃酮、7種酚酸、辛弗林、5種類胡蘿卜素和果皮揮發(fā)性成分進(jìn)行差異性分析，為雜柑深加工提供數(shù)據(jù)支撐。并分別從理化指標(biāo)、果皮、果肉、果汁營(yíng)養(yǎng)功能成分和果皮揮發(fā)性成分對(duì)我國(guó)7種雜柑進(jìn)行評(píng)價(jià)。不同品種雜柑不同部位所含營(yíng)養(yǎng)功能成分存在差異，和其他柑橘種類一致，同一品種不同部位鮮樣營(yíng)養(yǎng)功能成分含量均為果皮>果肉>果汁。雜柑果皮是橙皮苷的主要來源；雜柑中酚酸以肉桂型酚酸為主；雜柑類胡蘿卜素含量較低，以β-隱黃質(zhì)為主；沃柑和W默科特可作為辛弗林的良好來源；揮發(fā)性成分以萜烯類為主。不同評(píng)價(jià)方式評(píng)價(jià)結(jié)果不同，從可溶性固形物、可滴定酸、固酸比、可食率判斷紅美人屬優(yōu)等果，沃柑屬一等果，其余品種為等級(jí)外。對(duì)16種營(yíng)養(yǎng)功能成分進(jìn)行主成分分析，果皮選取前5個(gè)主成分，解釋94.4%指標(biāo)，評(píng)價(jià)結(jié)果為W默科特>沃柑>紅美人>不知火>春見>大雅柑>清見；果肉選取前5個(gè)主成分，解釋95.0%指標(biāo)，評(píng)價(jià)結(jié)果為沃柑>W默科特>不知火>大雅柑>紅美人>春見>清見；果汁選取前4個(gè)主成分，解釋93.0%指標(biāo)，評(píng)價(jià)結(jié)果為春見>沃柑>W默科特>清見>大雅柑>不知火>紅美人。對(duì)11種揮發(fā)性成分進(jìn)行主成分分析，選取前4個(gè)主成分，解釋93.8%指標(biāo)，評(píng)價(jià)結(jié)果為紅美人>沃柑>清見>不知火>春見>W默科特>大雅柑。值得關(guān)注的是本研究中沃柑的評(píng)價(jià)結(jié)果都靠前，具有一定的發(fā)展前景。此外，由于柑橘所含生物活性成分復(fù)雜，采用不同的指標(biāo)評(píng)價(jià)會(huì)有不同的結(jié)果，本文為雜柑果實(shí)評(píng)價(jià)提供思路，此后可以選取更多指標(biāo)進(jìn)行更為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。