雛鴨黃曲霉毒素中毒自然病例的病理學(xué)診斷-醫(yī)學(xué)論文

樣品的采集與處理對發(fā)病雛鴨進(jìn)行心臟采血。待自然凝固后，3000r/min離心10min，分離血清，4℃保存，以備血清生化指標(biāo)的測定，所有血清樣品均在采集后24h內(nèi)測定。待采血結(jié)束后經(jīng)頸靜脈放血致死，剖檢，觀察發(fā)病雛鴨的大體病變，采取肝臟組織于10％中性福爾馬林溶液中固定。 1．2．3血清生化指標(biāo)測定用半自動生化分析儀測定血清中血糖(GLU)、總蛋白(TP)含量、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的變化。血清葡萄糖為葡萄糖氧化酶法；總蛋白為雙縮脲法；天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均為連續(xù)監(jiān)測法。 1．2．4肝臟組織病理學(xué)觀察取固定完全的雛鴨肝臟組織。經(jīng)常規(guī)石蠟包埋、切片、H．E染色，光鏡下觀察病理組織學(xué)變化。 1．2．5鴨胚、雛鴨接種試驗(yàn)取病死鴨肝臟，研磨，1：5稀釋，加青、鏈霉素各1000IU/mL，反復(fù)凍融3次，3000r/min離心30min取上清液，接種10日齡鴨胚10個，0.2mL/胚，另外用滅菌生理鹽水對照接種2個鴨胚。接種1日齡雛鴨10羽，0.3mL/羽。 1．2．6飼料檢測采集發(fā)病雛鴨使用的飼料樣品送華中農(nóng)業(yè)大學(xué)飼料檢測站檢測黃曲霉毒素B1含量。 2結(jié)果 2．1發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果和I臨床癥狀湖北省隨州某種鴨場共有種雛鴨1萬余套，自3日齡開始發(fā)病。自發(fā)病到送檢的1周時間內(nèi)，該批種鴨發(fā)病1000只，死亡50只，病死率5％。武漢市新州區(qū)某肉鴨場有肉鴨2000只，9日齡開始發(fā)病，發(fā)病5d，發(fā)病600只，死亡60只，病死率10％。湖北省襄樊某肉鴨場有肉鴨3000只，9日齡開始發(fā)病，至19日齡，發(fā)病1400只，死亡1260只，病死率90％。病鴨表現(xiàn)為食欲減退，生長緩慢、嗜睡呆立，衰弱，步態(tài)不穩(wěn)、跛行，少數(shù)病鴨腳和腿由于皮下出血而呈淡紫色。病雛鴨死前常有抽搐，死亡后呈角弓反張現(xiàn)象。 2．2剖檢病變主要病變在肝臟，發(fā)現(xiàn)肝臟明顯腫大，表面粗糙，肝質(zhì)地較硬，肝表面有白色網(wǎng)格狀花紋，膽囊充盈。脾臟明顯腫大。外觀呈網(wǎng)格狀花紋。十二指腸黏膜充血、出血，腎臟腫脹充血。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞排列紊亂，腫脹變圓。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有圓形空泡，發(fā)生嚴(yán)重的脂肪變性，肝細(xì)胞壞死；匯管區(qū)和肝小葉內(nèi)膽管上皮細(xì)胞呈條索狀或團(tuán)塊狀增生，增生的膽管上皮細(xì)胞向肝小葉內(nèi)伸展。 2．3鴨胚、雛鴨接種實(shí)驗(yàn) 10個鴨胚在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)均正常孵化出殼； 10羽雛鴨接種24h、48h、72h后均無死亡，生長亦未受到抑制。體重增重正常。 2．4血清生化檢驗(yàn)雛鴨血清生化指標(biāo)測定結(jié)果見表1。 2．5飼料檢驗(yàn)經(jīng)檢測飼料中黃曲霉毒素B1含量分別為6.7ug/kg、6.4ug/kg和8.3ug/kg。 3討論上述鴨場發(fā)病雛鴨的主要病變都發(fā)生在肝臟，表現(xiàn)為質(zhì)地較硬，表面粗糙，組織病理學(xué)變化為肝細(xì)胞脂肪變性，肝組織間質(zhì)有明顯的膽管上皮細(xì)胞增生，可以診斷發(fā)病雛鴨是黃曲霉毒素中毒。鴨胚及雛鴨的接種實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明該鴨場此次暴發(fā)的疾病不是由細(xì)菌或病毒所引起的。臨床上常用血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活性來鑒別診斷肝病的性質(zhì)和程度。當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥、壞死、中毒等損害時，轉(zhuǎn)氨酶就會由肝細(xì)胞釋放到血中，引起血中轉(zhuǎn)氨酶升高。本實(shí)驗(yàn)測定了發(fā)病雛鴨血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的濃度。與正常比較，血清中轉(zhuǎn)氨酶升高，表明肝臟受損。黃曲霉毒素是一組次級真菌代謝產(chǎn)物，在我國飼料檢測中以B1計(jì)，目前飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)僅對黃曲霉毒素B1的安全限量有規(guī)定。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定肉用仔鴨前期、雛鴨配合飼料及濃縮飼料≤10ug/kg，肉用仔鴨后期、生長鴨、產(chǎn)蛋鴨配合飼料及濃縮飼料≤15ug/kg。發(fā)病鴨場飼料黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果均符合國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，但有研究表明，飼料中含黃曲霉毒素1ug/kg即可引起中毒。動物因種類、性別、年齡、營養(yǎng)狀況不同對黃曲霉毒素B1的敏感性不同，最敏感的動物為雛鴨。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，對飼料黃曲霉毒素檢測的結(jié)果只能作為通常情況下的參考值。而不是絕對的量度標(biāo)準(zhǔn)。目前對黃曲霉毒素引起的中毒無有效的治療方法，重在預(yù)防，防止飼料霉變，提高飼料質(zhì)量意識，切實(shí)加強(qiáng)飼料原料及其產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)督和管理是關(guān)鍵。